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本發明公開了一種利用肽配基親和純化凝血因子VIII的方法，該方法選用了對人凝血因子Ⅷ的特異性的肽配基作為親和基質，并將該特異性的肽配基固定在瓊脂糖凝膠載體上，實現凝血因子Ⅷ的快速、特異、高效純化。其中，所述肽配基為能與凝血因子VIII發生親和反應的多肽；所述多肽為EYCPC、GCVSGCLCWEYC和RKWNCTDHEYC中的任意一種或者EYCPC、GCVSGCLCWEYC和RKWNCTDHEYC按任意比混合后得到的混合物。利用該方法得到的凝血因子VIII的得率高、比活高，可以實現凝血因子Ⅷ的規模化純化與制備。

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