本發明屬于生物醫藥技術領域,尤其涉及人源Tsg101?Vps28?Vps37?Mvb12A四元復合物的制備方法及應用。通過分別針對人源Tsg101、Vps28、Vps37和Mvb12A設計截短體;獲取組成人源ESCRT?I復合物的四種亞基的截短體編碼序列片段;分別克隆至昆蟲表達載體并轉化DH10Bac感受態細胞獲得重組Bacmid桿粒;將四種重組桿粒分別轉染sf9昆蟲細胞產生重組桿狀病毒并擴增至P2代病毒儲液,將四種P2代病毒等比例感染sf9細胞進行目的蛋白表達;經層析純化獲得人源ESCRT?I四元復合物。該復合物為解析ESCRT?I復合物結構及闡釋ESCRT?I復合物介導膜出芽機制奠定基礎。
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