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本發(fā)明公開了一種雙順反子表達(dá)載體、表達(dá)系統(tǒng)、制備方法及應(yīng)用，屬于基因工程技術(shù)領(lǐng)域。該表達(dá)載體包含核基質(zhì)結(jié)合區(qū)序列、內(nèi)核糖體進入位點序列和篩選標(biāo)記，通過在啟動子與IRES序列之間插入目的基因，可構(gòu)成目的基因?IRES序列?篩選標(biāo)記基因依次連接的雙順反子序列。表達(dá)載體的結(jié)構(gòu)為：MAR?啟動子?目的基因?IRES序列?篩選標(biāo)記?PolyA?MAR。該載體利用一個啟動子實現(xiàn)目的基因和篩選標(biāo)記的同時表達(dá)，可減少由于不同表達(dá)框存在導(dǎo)致的假陽性細(xì)胞克隆，提高陽性細(xì)胞克隆篩選率，并克服傳統(tǒng)載體目的基因與篩選標(biāo)記表達(dá)不均衡的問題；載體上包含MAR序列能克服轉(zhuǎn)基因沉默，實現(xiàn)轉(zhuǎn)基因在宿主細(xì)胞中的高效、長期表達(dá)。

1、選定專利：顧問一對一服務(wù)，幫助買家選中所需專利，并確認(rèn)賣家專利可交易；

2、簽訂合同：買賣雙方與顧問協(xié)商交易細(xì)節(jié)，簽訂合同；

3、支付款項：買家依合同約定支付交易款項到運營平臺；

4、提供材料：買賣雙方需要提供《專利代理委托書》、《轉(zhuǎn)讓協(xié)議》、《解聘書》等材料給辦理轉(zhuǎn)讓手續(xù)方；

5、辦理手續(xù)：辦理轉(zhuǎn)讓手續(xù)方提交材料至國家知識產(chǎn)權(quán)局辦理轉(zhuǎn)讓手續(xù)，國家知識產(chǎn)權(quán)局最快半個月左右下發(fā)專利轉(zhuǎn)讓《手續(xù)合格通知書》；

6、證書交接：買家確認(rèn)收到《專利證書》、專利轉(zhuǎn)讓《手續(xù)合格通知書》原件，確認(rèn)無誤。

7、交易完成：平臺把交易款項支付給賣家，至此專利轉(zhuǎn)讓業(yè)務(wù)完成。

保障一：對于在本平臺交易的交易品，均由我平臺驗證交易品的有效性；

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